جزوه آزمایشگاه ژنتیک مولکولی ویرایش جدید

دانشجویان و کاربران گرامی ، محتوای این فایل جزوه آزمایشگاه ژنتیک مولکولی دکتر عطاریان ویرایش جدید می باشد که در قالب pdf در ۳۷ صفحه بصورت تایپ شده تهیه و تدوین گردیده است .امید است که سودمند بود و مورد استفاده شما عزیزان واقع گردد . در صورت تمایل می توانید این فایل ارزشمند را از وبسایت ما با مناسب ترین قیمت خریداری و دانلود نمایید.

بخشی از متن:

جلسه اول:

cloning کلونینگ:

برای جداسازی ژن های طویل و بلند و ناشناخته از کلونینگ استفاده میکنیم. در کلونینگ در بازه زمانی چند هفته به نتیجه کار میرسیم.

برای جداسازی ژن هایی که از قبل توالی آنها شناخته شده است از PCR استفاده میکنیم. در PCR در عرض چند ساعت به نتیجه میرسیم.

هدف کلونینگ:

تولید یک حامل یا وکتوری است که ژن مورد نظر را در آن قرار دهیم و آن DNA نوترکیب را داخل سلول میزبان بگذاریم و آن را تکثیر دهیم.

مراحل کلونینگ:

۱- قرار گرفتن ژن موردنظر به داخل وکتور و ایجاد یک وکتور نوترکیب.
۲- انتقال وکتور نوترکیب به باکتری یا سلول میزبان.
۳- تکثیر وکتور در سلول میزبان.
۴- تقسیم سلول میزبان.
۵- مجموعه ای کلونی باکتری که دارای نسخه هایی از ژن موردنظر ما است.

مرحله اول قبل از کلونینگ استخراج DNA *است هم از پلاسمید هم از ژنوم است.

E.coli*به دلیل اینکه توانایی جذب و دریافت وکتور یا DNA خارجی را داشته باشد باید یکسری ویژگی ها روی باکتری اعمال شود.(تبدیل به یک سلول صلاحیت دار شود.)

یکسری شوک های الکتریکی و دمایی به آنها داده می شود تا باکتری ها صلاحیت دار شوند .

بعد از Transformation باید باکتری هایی که حالت صحیح را دریافت کرده اند از بقیه جدا کنیم تا بعد از تکثیر قطعه موردنظر ما تکثیر پیدا کند. ۲ روش اساسی داریم:

۱- روش غربالگری ۲- روش انتخاب

*میزبانی را که برای انتقال انتخاب می کنیم بستگی به ژنی دارد که قرار است کلون شود. در مورد ژن های انسانی که نیاز به پروتئین دارند میزبان ما مخمر است. به ۳ دلیل:

….

مطالعه بیشتر